現(xiàn)在是時候與您的血細胞計數(shù)器分手了嗎？
時間：2021-01-05 09:37 點擊次數(shù)：
細胞培養(yǎng)幾乎總是包括對細胞進行計數(shù)的步驟。無論目標是確定傳代的合適接種量，下游實驗的收獲細胞還是監(jiān)測細胞健康，細胞計數(shù)的準確性和效率至關(guān)重要。盡管血細胞計數(shù)法已用于計數(shù)細胞數(shù)十年，但人們越來越認識到它的局限性，導(dǎo)致許多研究人員考慮使用替代方法。借助基于現(xiàn)代Coulter計數(shù)器的系統(tǒng)，比以往任何時候都可以更快，更輕松，更一致地進行細胞計數(shù)-都在方便的手持式設(shè)備中-您和您的血細胞計數(shù)器告別了嗎？菌落計數(shù)器產(chǎn)品
眾所周知，基于血細胞計數(shù)儀的細胞計數(shù)不準確
雖然血細胞計數(shù)法是最常見的細胞計數(shù)方法，可廣泛使用且價格相對便宜，但它既費時又容易出錯。簡而言之，在典型的基于血細胞計數(shù)器的細胞計數(shù)過程中，將載玻片放在計數(shù)室上方；用移液管將10 µL稀釋的細胞樣品（通常用染色劑，如錐蟲藍處理）加到血細胞計數(shù)器中。使用顯微鏡手動計數(shù)細胞；然后進行計算以獲得以細胞/ mL為單位的細胞濃度。
這些步驟中的每一個都可能是錯誤的主要來源。載玻片放置不充分和移液技術(shù)不佳都會導(dǎo)致將不正確的體積裝入血細胞計數(shù)器，而手動計數(shù)細胞又是不準確的另一個原因-在是否計數(shù)接觸計數(shù)邊緣的細胞時經(jīng)常會產(chǎn)生混淆室場，或是否應(yīng)該將細胞分類為活的還是死的。后一種問題由于許多染色試劑使用不當而具有細胞毒性這一事實使問題更加復(fù)雜。在計算階段，錯誤也很常見，用戶經(jīng)常無法計算稀釋系數(shù)，忘記將其除以所使用的計數(shù)室字段數(shù)，或者乘以除10的四次方之外的其他值確定最終細胞濃度。
錯誤的細胞計數(shù)可能是災(zāi)難性的
根據(jù)對單元進行計數(shù)的原理，將事情弄錯的下游影響可能會有很大不同。在傳代過程中高估了細胞數(shù)量的情況下，新接種的細胞群體可能稀疏而無法存活。相反，繁殖過程中細胞數(shù)量的低估會導(dǎo)致細胞過度擁擠，從而導(dǎo)致細胞發(fā)生表型變化。使用太少的細胞進行蛋白質(zhì)提取，免疫檢測或功能測定可能意味著目標靶標無法檢測或結(jié)果偏斜。當認為數(shù)據(jù)不可靠并且必須重復(fù)實驗時，對細胞健康狀況的不正確評估可能會浪費時間和資源。由于這些原因，許多研究人員更喜歡庫爾特計數(shù)技術(shù)，而不是基于血細胞計數(shù)器的細胞計數(shù)方法。
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